控制猪肺炎支原体暴露是清除病原体的重要工具(勻漿暴露動物)

由于对产仔舍内情况不稳定的动物的病原体脱落动力学及其对下游猪群的影响有了更好的了解，养猪业更多地关注了对猪肺炎支原体（M. hyo）暴露的控制。
1,2 控制暴露也有助于确定猪肺炎支原体清除程序的第0天3,4。

如何控制猪肺炎支原体的暴露取决于期望育种猪群能达到的最终状态。
当生产越来越多的无M. hyo的后备育种动物时，就更需要在应保持稳定或变得稳定的阳性猪群和旨在变为阴性或不进行治疗的M. hyo阳性猪群中考虑M. hyo暴露机制。

此外，当与M. hyo隔离程序结合使用时，将猪群的全部或部分暴露于M. hyo通常被认为是猪群隔离过程的早期关键第一步。

无论育种猪群的最终M. hyo状态如何，后备小母猪和/或成熟育种动物M. hyo暴露控制的目标都是改善终端市场动物的性能。

暴露方法

感染小母猪

将感染动物用于猪肺炎支原体暴露已在美国养猪业中广泛采用。
当使用感染动物时，应考虑病原体脱落的持续时间。
Pieters等人（2009）证明动物可使M. hyo脱落200天以上。
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如果使用最佳数量的感染动物，可用感染动物来使后备母猪成功暴露。
6但感染动物与后备动物的比值要很高，这对于隔离设施和小母猪发育设施中的动物流动是一个挑战。
这可能对生产实践造成次优影响，并增加养育后备育种家畜的成本。

此外，由于最终会产生免疫力，因此感染动物的感染和病原体脱落有可能随时间减少。

气管内接种

气管内接种是个体动物暴露于猪肺炎支原体的另一种选择。
该方法已在研究环境和激发模型中得到明确定义。
7在将感染动物用于猪群清除程序之前，该方法也用于使感染动物暴露。

该方法涉及通过气管内导管给予个体动物肺匀浆接种物。
这具有挑战性，为劳动密集型，需要由多名人员对动物进行约束，以正确执行接种程序。

气溶胶暴露

气溶胶暴露是M. hyo暴露于大量动物的一种侵入性较小且劳动强度较低的方法。
8,9 这需要将肺匀浆接种物与培养基混合，通过机械雾化器进行雾化。

农场人员可在饲养待暴露动物的设施中携带或使机械雾化器均匀分布。
在某些情况下，已通过调整通风来提高暴露动物的呼吸率，目的是增加雾化M. hyo匀浆的吸入。
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匀浆最常用的培养基是Friss培养基（Teknova, Hollister, CA），但已对替代培养基（如盐水）进行了评价，经证明合格。
当在雾化器中稀释源匀浆时，也使用了不同比例的肺匀浆与培养基。
匀浆稀释后，报告的剂量范围为每只小母猪8mL-16mL。
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成功暴露所需的机械雾化器数量存在差异，可能与饲养待暴露动物的畜棚内空间或房间空间相关。

在两项具有不同房间设计的研究中描述了该程序。
Nickel等人（2018）在两个保育室内使用了5个雾化器，而Hewitt等人（2019）在自然通风的畜棚中用2个雾化器来使一栏动物（125只）暴露。
13 一些生产系统报告称，在母猪场用雾化器来确定M. hyo清除程序中猪群隔离的第0天。

已经探索了可能影响结果的几个变量，即畜棚设计、通风调整、所需雾化器数量、每只后备小母猪的匀浆剂量以及成功执行气溶胶暴露的培养基和匀浆的稀释比，但需要在该领域进行更多研究。

供体动物

必须选择供体动物以制备用于气管内和气溶胶接种技术的肺匀浆材料。
在选择用于制备猪群特异性肺匀浆的供体动物时，应慎重考虑。
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在假定阳性动物中观察到M. hyo临床体征并通过尸检肺组织或支气管拭子的特异性实时聚合酶链反应（PCR）检测确认阳性状态后，可选择供体动物。
或者，可在人道安乐死前采集供体动物的死前样本（如喉拭子或气管拭子），并通过PCR进行检测。

肺匀浆

选择供体动物后，可对来自人道安乐死动物的肺组织进行评估，以确定是否存在M. hyo感染的病变。
此外，在制备匀浆前，应提交一部分肺进行PCR检测，以确认是否存在M. hyo。

Marois等人（2010）先前已经描述了成功定植M. hyo所需的最小感染剂量（1×105 CCU/mL）。
Robbins等人（2019）建议，对于选择用于匀浆制备的组织，PCR循环阈值的标准为≤26。
已报告了M. hyo菌株之间的变异，当在特定小母猪适应程序中做出基于猪群的决策时，应考虑该变异。

为制备匀浆，使用标准家用或工业型厨房混合器将全肺组织与液体培养基混合，直至达到浆液稠度。
在一些研究中，使用混合器后，匀浆过滤机械装置被用来控制稠度。
在不同研究之间，推荐的组织与培养基的比例不同（60:40或70:30）。
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混合匀浆浆液通常在-80°C下以小等份的形式储存。
17,18 匀浆中M. hyo细菌随时间的生存力尚不明确，但匀浆已成功储存部分M. hyo菌株长达3年。
细菌滴度可能发生菌株依赖性对数下降，并可能影响匀浆在暴露程序中的成功使用。
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在用于暴露方法之前，必须解冻肺匀浆。
在田野环境中，可以将匀浆置于冷却器中，转移到农场，并使用流动冷水浴解冻。
解冻后，可根据气管内或气溶胶暴露的需要进一步稀释匀浆。

暴露验证

在任何暴露过程之后，应验证是否成功。
有多种技术可用于采集暴露后的死前样本。
20常用样本类型包括喉拭子、气管支气管拭子和血清。
对要采集的样本类型做出决策时，应根据具体的猪群来考虑死前样本类型的检测时间和灵敏度。
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需要更多研究

随着M. hyo被清除的猪群数量不断增加，M. hyo的暴露控制方法也在不断发展。
Fano等人在去年秋季的一项研究中评估了小母猪暴露的雾化技术，这为进一步了解该主题提供了帮助。
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尽管这一方法得以发展，但关于匀浆制备技术、匀浆内M. hyo细菌随时间的生存力以及M. hyo菌株间变异的临床意义（如有）仍存在知识缺口。

此外，供体动物匀浆中可能含有的次生病原体对接受匀浆的猪群健康的影响尚未得到充分证实。

最后，在这些暴露方法中，应用每种方法的各种环境，以及这些差异如何影响M. hyo暴露程序的成功，既未标准化也未得到充分研究。

这些因素强调了需要继续研究与M. hyo相关的控制、暴露和清除程序。