琼脂糖凝胶的功能应用(緩沖液瓊脂凝膠)

一、什么是琼脂糖凝胶

琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。
琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂糖，琼脂糖的熔点在62〜65°C之间，融化后在37°C下可维持液态数小时，30°C时凝固成胶。
多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。
琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的分离。

二、琼脂糖凝胶用途

琼脂糖凝胶可以用于生化、医学研究领域。
在生化上可作为凝胶电泳的支持物和亲和层析的载体，在医学上还可用于研究病毒嗜菌体、细菌、临床检验、生化分析、蛋白质、核酸、抗原、抗体，以及多糖的分离、提纯及药物的制备。

做一个完美的琼脂糖凝胶图，缓冲液的选择很重要。

三、如何选择合适的缓冲液

最常用的缓冲液是TAE缓冲液和TBE缓冲液。
一般来说，实验室通常选择这两者中的其中一种缓冲液，所以了解两个缓冲液之间的区别对您的实验是非常重要的，那么如何区分这两个缓冲液呢：

1.TAE是Tris-乙酸，缓冲容量小，但是溶解度大，易于储存；TBE是Tris-硼酸，缓冲容量大，但是溶解度小，不易长期储存，易产生沉淀。

2.TAE适合较大的DNA片段，而TBE适合较小的DNA片段。

3.如果凝胶运行时间长，建议使用TBE。
如果您计划将DNA用于任何下游应用，则建议您使用TBE。

4.TAE易于储存，更加稳定，而TBE几周内会出现沉淀。

四、新鲜的缓冲液

选择好缓冲液后，准备一份从未使用过的缓冲，新鲜的小份缓冲液，可以储存5倍或10倍的缓冲液等，但使用前一定要稀释。
使用新鲜的缓冲液，用于制备凝胶.实验结果会变得更清晰，条带更均匀。

五、缓冲液的温度把控

正所谓慢工出细活，制作活琼脂糖凝胶一定要有耐心。
凝胶运行电泳电压应在75V以下，缓冲液不要过热。
缓冲液的温度是是造成条带不清晰、不均匀的主要原因之一。
为了防止缓冲液出现过热的情况，在运行前，可以将缓冲液或凝胶冷却，或在冷藏室运行凝胶。

文章来源：艾美捷科技

欢迎关注微信公众号：amyjetsci

用最专业的精神，开放性的思维，与你一起探索行业走向，快速了解这个领域！